สามารถใช้ม้านั่งที่สะอาดสำหรับการเพาะเลี้ยงเซลล์ได้หรือไม่?

การเพาะเลี้ยงเซลล์เป็นเทคนิคพื้นฐานในการวิจัยทางชีวภาพเทคโนโลยีชีวภาพและการพัฒนายา มันเกี่ยวข้องกับการเจริญเติบโตและการบำรุงรักษาเซลล์ในสภาพแวดล้อมที่ควบคุมนอกที่อยู่อาศัยตามธรรมชาติของพวกเขา สภาพแวดล้อมที่สะอาดเป็นสิ่งสำคัญสำหรับการเพาะเลี้ยงเซลล์ที่ประสบความสำเร็จเพื่อป้องกันการปนเปื้อนและตรวจสอบให้แน่ใจว่ามีความสมบูรณ์ของเซลล์ อุปกรณ์ชิ้นหนึ่งที่มักจะพิจารณาถึงการสร้างสภาพแวดล้อมที่สะอาดคือม้านั่งที่สะอาด ในฐานะผู้จัดหาผู้ดูแลที่สะอาดฉันมักถูกถามว่าม้านั่งสะอาดสามารถใช้สำหรับการเพาะเลี้ยงเซลล์ได้หรือไม่ ในโพสต์บล็อกนี้ฉันจะสำรวจคำถามนี้โดยละเอียด

ทำความเข้าใจกับม้านั่งที่สะอาด

ม้านั่งที่สะอาดหรือที่เรียกว่าตู้ไหลแบบราบเรียบได้รับการออกแบบมาเพื่อให้สภาพแวดล้อมการทำงานที่สะอาดโดยการกำกับอากาศที่ผ่านการกรองบนพื้นผิวการทำงาน มีสองประเภทหลักของม้านั่งที่สะอาด: การไหลแบบราบเรียบแนวนอนและแนวตั้ง ในการไหลของลามินาร์ในแนวนอนทำความสะอาดอากาศที่ผ่านการกรองอากาศจะไหลในแนวนอนข้ามพื้นผิวการทำงานจากด้านหลังของม้านั่งไปยังผู้ปฏิบัติงาน ในการไหลของลามินาร์ในแนวตั้งที่ทำความสะอาดม้านั่งอากาศที่ผ่านการกรองจะไหลลงในแนวตั้งลงบนพื้นผิวการทำงาน

ฟังก์ชั่นหลักของม้านั่งที่สะอาดคือการปกป้องงานจากการปนเปื้อนของฝุ่นละออง อากาศภายในม้านั่งที่สะอาดจะถูกส่งผ่านอากาศที่มีประสิทธิภาพสูง (HEPA) หรือตัวกรองการเจาะอากาศต่ำ (ULPA) ซึ่งสามารถกำจัดอนุภาคที่มีขนาดเล็กถึง 0.3 ไมโครเมตรที่มีประสิทธิภาพสูง (ปกติ 99.97% หรือสูงกว่า) สิ่งนี้สร้างระดับ 100 (ISO 5) หรือสภาพแวดล้อมที่ดีกว่าภายในม้านั่งซึ่งหมายความว่ามีอนุภาคไม่เกิน 100 อนุภาคต่อลูกบาศก์ฟุตของอากาศที่มีขนาด 0.5 ไมโครเมตรหรือใหญ่กว่า

ข้อกำหนดสำหรับการเพาะเลี้ยงเซลล์

การเพาะเลี้ยงเซลล์ต้องการสภาพแวดล้อมที่ควบคุมได้สูงเพื่อรองรับการเจริญเติบโตของเซลล์และป้องกันการปนเปื้อน ข้อกำหนดที่สำคัญ ได้แก่ :

การทำให้หมัน: เซลล์มีความไวต่อการปนเปื้อนอย่างมากโดยแบคทีเรียเชื้อราไวรัสและจุลินทรีย์อื่น ๆ การปนเปื้อนใด ๆ สามารถนำไปสู่การตายของเซลล์ผลการทดลองที่ไม่ถูกต้องและการสูญเสียเซลล์ที่มีค่า
การควบคุมอุณหภูมิและความชื้น: เซลล์สัตว์เลี้ยงลูกด้วยนมส่วนใหญ่ได้รับการเพาะเลี้ยงที่ 37 ° C และความชื้นสัมพัทธ์ประมาณ 95% การรักษาเงื่อนไขเหล่านี้เป็นสิ่งจำเป็นสำหรับความมีชีวิตและการเจริญเติบโตของเซลล์
องค์ประกอบของก๊าซ: เซลล์ต้องการองค์ประกอบของก๊าซที่เฉพาะเจาะจงโดยทั่วไปจะเป็นส่วนผสมของออกซิเจนและคาร์บอนไดออกไซด์ สำหรับเซลล์ของสัตว์เลี้ยงลูกด้วยนมนั้นมีการใช้บรรยากาศCO₂ 5% เพื่อรักษาค่า pH ของสื่อการเพาะเลี้ยง
อุปทานสารอาหาร: เซลล์ต้องการอาหารเลี้ยงเชื้อที่เหมาะสมซึ่งให้สารอาหารที่จำเป็นเช่นกรดอะมิโนวิตามินแร่ธาตุและปัจจัยการเจริญเติบโต

ใช้ม้านั่งที่สะอาดสำหรับการเพาะเลี้ยงเซลล์

ม้านั่งที่สะอาดสามารถมีบทบาทสำคัญในการเพาะเลี้ยงเซลล์ แต่มีทั้งข้อดีและข้อ จำกัด

ข้อดี

การป้องกันการปนเปื้อน: ข้อได้เปรียบหลักของการใช้ม้านั่งที่สะอาดสำหรับการเพาะเลี้ยงเซลล์คือความสามารถในการให้สภาพแวดล้อมที่สะอาด อากาศที่ผ่านการกรองในม้านั่งที่สะอาดช่วยลดการแนะนำของอนุภาคอากาศและจุลินทรีย์ลดความเสี่ยงของการปนเปื้อนในระหว่างขั้นตอนการจัดการเซลล์เช่นการเปลี่ยนแปลงของสื่อการผ่านเซลล์และการเตรียมตัวอย่าง
การป้องกันผู้ประกอบการ: นอกเหนือจากการปกป้องเซลล์แล้วม้านั่งที่สะอาดยังให้การป้องกันในระดับหนึ่งสำหรับผู้ปฏิบัติงาน การไหลของอากาศแบบราบเรียบสามารถป้องกันการแพร่กระจายของละอองลอยที่เกิดขึ้นในระหว่างขั้นตอนการเพาะเลี้ยงเซลล์ลดความเสี่ยงของการสัมผัสกับวัสดุชีวภาพที่อาจเป็นอันตราย
ความอเนกประสงค์: ม้านั่งทำความสะอาดค่อนข้างง่ายในการติดตั้งและสามารถใช้ในการตั้งค่าในห้องปฏิบัติการที่หลากหลาย พวกเขาเหมาะสำหรับการดำเนินการเพาะเลี้ยงเซลล์ขนาดเล็กและขนาดใหญ่ทำให้พวกเขาเป็นตัวเลือกยอดนิยมสำหรับห้องปฏิบัติการวิจัยหลายแห่ง

ข้อ จำกัด

ขาดอุณหภูมิความชื้นและการควบคุมก๊าซ: หนึ่งในข้อ จำกัด ที่สำคัญของม้านั่งที่สะอาดคือมันไม่ได้ควบคุมอุณหภูมิความชื้นหรือองค์ประกอบของก๊าซ เซลล์ที่เพาะเลี้ยงในม้านั่งที่สะอาดจะได้สัมผัสกับสภาพห้องปฏิบัติการโดยรอบซึ่งอาจไม่เหมาะสมสำหรับการเจริญเติบโตของเซลล์ ตัวอย่างเช่นหากอุณหภูมิห้องปฏิบัติการต่ำหรือสูงเกินไปอาจส่งผลกระทบต่อการเผาผลาญของเซลล์และความมีชีวิต ในทำนองเดียวกันหากไม่มีความชื้นและการควบคุมก๊าซที่เหมาะสมค่า pH ของสื่อการเพาะเลี้ยงอาจเปลี่ยนไปซึ่งนำไปสู่ความเครียดของเซลล์หรือความตาย
การฆ่าเชื้อที่ จำกัด: ในขณะที่ม้านั่งที่สะอาดสามารถลดความเสี่ยงของการปนเปื้อนในอากาศ แต่ก็ไม่ได้กำจัดความเสี่ยงของการปนเปื้อนจากแหล่งอื่นอย่างสมบูรณ์ ตัวอย่างเช่นพื้นผิวของม้านั่งและอุปกรณ์ที่ใช้ภายในม้านั่งจะต้องได้รับการฆ่าเชื้ออย่างเหมาะสมก่อนการใช้งานแต่ละครั้ง ถ้าไม่พวกเขาสามารถทำหน้าที่เป็นแหล่งที่มาของการปนเปื้อน นอกจากนี้มือและเสื้อผ้าของผู้ปฏิบัติงานสามารถพกพาจุลินทรีย์และต้องปฏิบัติตามเทคนิคปลอดเชื้อที่เหมาะสมเพื่อป้องกันการปนเปื้อน

อุปกรณ์เสริม

เพื่อเอาชนะข้อ จำกัด ของม้านั่งที่สะอาดในการเพาะเลี้ยงเซลล์มักจำเป็นต้องใช้อุปกรณ์เสริม

เครื่องฟักไข่: ตู้อบเป็นสิ่งจำเป็นสำหรับการให้อุณหภูมิที่เหมาะสมความชื้นและองค์ประกอบของก๊าซสำหรับการเพาะเลี้ยงเซลล์ เซลล์สามารถถ่ายโอนไปยังศูนย์บ่มเพาะหลังจากจัดการในม้านั่งที่สะอาดเพื่อให้การเจริญเติบโตและการบำรุงรักษา มีศูนย์บ่มเพาะชนิดต่าง ๆ เช่นตู้อบCO₂และตู้อบที่ขาดออกซิเจนซึ่งสามารถเลือกได้ตามข้อกำหนดเฉพาะของเซลล์
หม้อนึ่งความดันและสารฆ่าเชื้อ: หม้อนึ่งความดันและการฆ่าเชื้อใช้ในการฆ่าเชื้ออุปกรณ์สื่อและวัสดุอื่น ๆ ที่ใช้ในการเพาะเลี้ยงเซลล์ ด้วยการทำให้มั่นใจว่าวัสดุทั้งหมดได้รับการฆ่าเชื้ออย่างเหมาะสมความเสี่ยงของการปนเปื้อนสามารถลดลงได้อีก
ระบบตรวจสอบอนุภาคฝุ่นออนไลน์: ระบบนี้สามารถใช้ในการตรวจสอบความเข้มข้นของอนุภาคภายในม้านั่งที่สะอาดและสภาพแวดล้อมโดยรอบอย่างต่อเนื่อง โดยการตรวจจับการเพิ่มขึ้นของระดับอนุภาคมันสามารถเตือนผู้ปฏิบัติงานเกี่ยวกับความเสี่ยงที่อาจเกิดขึ้นและอนุญาตให้ดำเนินการแก้ไขได้ทันเวลา

อุปกรณ์คลีนรูมอื่น ๆ สำหรับการเพาะเลี้ยงเซลล์

นอกเหนือจากม้านั่งที่สะอาดแล้วยังมีอุปกรณ์ห้องทำความสะอาดอื่น ๆ ที่สามารถใช้ในสิ่งอำนวยความสะดวกในการเพาะเลี้ยงเซลล์เพื่อเพิ่มความสะอาดโดยรวมและความปลอดภัยของสิ่งแวดล้อม

ห้องสะอาด ffu: หน่วยกรองพัดลม (FFUs) ใช้เพื่อจัดหาอากาศที่ผ่านการกรองอย่างต่อเนื่องในห้องทำความสะอาด พวกเขาสามารถติดตั้งในเพดานหรือผนังของสิ่งอำนวยความสะดวกการเพาะเลี้ยงเซลล์เพื่อรักษาสภาพแวดล้อมอากาศที่สะอาดและสม่ำเสมอ
ห้องอาบน้ำหมอกสะอาด: ฝักบัวหมอกแบบสะอาดสามารถใช้เพื่อกำจัดสารปนเปื้อนของพื้นผิวจากบุคลากรและอุปกรณ์ก่อนที่จะเข้าไปในห้องทำความสะอาด สิ่งนี้ช่วยป้องกันการเปิดตัวสารปนเปื้อนในพื้นที่เพาะเลี้ยงเซลล์

บทสรุป

โดยสรุปแล้วสามารถใช้ม้านั่งที่สะอาดได้สำหรับการเพาะเลี้ยงเซลล์ แต่ไม่ใช่วิธีแก้ปัญหาแบบสแตนด์อโลน มันให้สภาพแวดล้อมการทำงานที่สะอาดซึ่งสามารถลดความเสี่ยงของการปนเปื้อนในอากาศในระหว่างขั้นตอนการจัดการเซลล์ได้อย่างมีนัยสำคัญ อย่างไรก็ตามเนื่องจากการขาดอุณหภูมิความชื้นและการควบคุมก๊าซจึงจำเป็นต้องใช้ร่วมกับอุปกรณ์อื่น ๆ เช่นตู้อบอเนกประสงค์และระบบตรวจสอบ

หากคุณมีส่วนร่วมในการเพาะเลี้ยงเซลล์และกำลังมองหาม้านั่งสะอาดที่เชื่อถือได้หรืออุปกรณ์คลีนรูมอื่น ๆ เราพร้อมให้ความช่วยเหลือ บริษัท ของเรานำเสนอม้านั่งสะอาดที่มีคุณภาพสูงและผลิตภัณฑ์ที่เกี่ยวข้องที่ออกแบบมาเพื่อตอบสนองความต้องการของแอพพลิเคชั่นการเพาะเลี้ยงเซลล์ที่แตกต่างกัน ไม่ว่าคุณจะเป็นห้องปฏิบัติการวิจัยขนาดเล็กหรือ บริษัท เทคโนโลยีชีวภาพขนาดใหญ่เราสามารถจัดหาโซลูชั่นที่เหมาะสมให้คุณได้ ติดต่อเราเพื่อหารือเกี่ยวกับความต้องการของคุณและเริ่มการเจรจาต่อรองการจัดซื้อวันนี้

การอ้างอิง

Freshney, RI (2010) วัฒนธรรมของเซลล์สัตว์: คู่มือเทคนิคพื้นฐานและแอพพลิเคชั่นพิเศษ Wiley - Liss
Pollard, JW, & Walker, JM (2017) โปรโตคอลการเพาะเลี้ยงเซลล์ขั้นพื้นฐาน Humana Press
ISO 14644 - 1: 2015 ห้องทำความสะอาดและสภาพแวดล้อมที่มีการควบคุมที่เกี่ยวข้อง - ส่วนที่ 1: การจำแนกความสะอาดของอากาศ